Комплет за откривање нуклеинска киселина нов коронавирус (SARS-Cov-2).
New Cороnavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluрудаscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Pпроизводиt name 】Комплет за откривање на нуклеинска киселина нов коронавирус (SARS-Cov-2) (флуоресцентен метод на сонда RT-PCR)
【Packaging specакоcations 】25 Тестови/комплет
【Intended usвозраста】
Овој комплет се користи за квалитативно откривање на нуклеинска киселина од нов коронавирус во назофарингеални брисеви, орофарингеални (грло) брисеви, предни назални брисеви, брисеви со средна турбина, назални миења и назални аспирати од поединци кои се сомнителни за COVID19 од нивниот давател на здравствена заштита. Откривањето на ORF1ab и N гените на новиот коронавирус може да се користи за помошна дијагноза и епидемиолошко следење на новата инфекција со коронавирус.
【Principles of the pросаdure 】
Овој комплет е дизајниран за специфични сонди TaqMan и специфични прајмери дизајнирани за секвенците на гените на новиот коронавирус (SARS-Cov-2) ORF1ab и N. Растворот за реакција на PCR содржи 3 сета специфични прајмери и флуоресцентни сонди за специфично откривање на цели, а дополнителен сет на специфични прајмери и флуоресцентни сонди се користи како внатрешна стандардна контрола на комплетот за откривање на ендогени гени за одржување на домот.
Принципот на тестирање е дека специфичната флуоресцентна сонда се вари и се разградува со егзонуклеазната активност на Taq ензимот во PCR реакцијата, така што репортерната флуоресцентна група и згасната флуоресцентна група се одвоени, така што системот за следење на флуоресценцијата може да прими флуоресцентна сигнал, а потоа Преку ефектот на збогатување на PCR засилување, флуоресцентниот сигнал на сондата достигнува одредена праг вредност-Ct вредност (Циклен праг). Во случај да нема целен ампликон, известувачката група на сондата е блиску до групата за гаснење. Во тоа време, се случува пренос на енергија на флуоресцентна резонанца, а флуоресценцијата на групата известувач се гаси од групата за гаснење, така што флуоресцентниот сигнал не може да се открие со флуоресцентниот PCR инструмент.
Со цел да се следи употребата на реагенси за време на тестот, комплетот е опремен со позитивни и негативни контроли: позитивната контрола содржи рекомбинантен плазмид на целната локација, а негативната контрола е дестилирана вода, која се користи за следење на загадувањето на животната средина. Се препорачува да се постави позитивна и негативна контрола истовремено при тестирањето.
【Main comпоненts 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Компоненти | |
| Намe | Спецификација | Количинатите | Количинатите | |
| Позитивна контрола | 180 μL/вијала | 1 | 1 | Вештачки конструирани плазмиди, дестилирана вода |
| Негативна контрола | 180 μL/вијала | 1 | 1 | Дестилирана вода |
| Мешавина од САРС-Ков-2 | 358,5 μL/вијала | 1 | / | Специфични парови на прајмери, флуоресцентни сонди за специфична детекција, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, дестилирана вода итн. |
| Ензимска мешавина | 16,5 μL/вијала | 1 | / | Taq ензими, реверзна транскриптаза, UNG ензими, итн. |
| Мешавина САРС-Ков-2 (лиофилирана) | 25 тестови/вијала | / | 1 | Специфични парови на прајмери, флуоресцентни сонди за специфична детекција, dNTPs, Taq ензими, обратна транскриптаза, дестилирана вода итн. |
| 2x тампон | 375 μL/вијала | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, дестилирана вода итн. |
Забелешка:(1) Компонентите во различни серии не може да се мешаат или заменуваат.
(2) Подгответе свој реагенс: комплет за екстракција на нуклеинска киселина.
【Storage condитиons и expiration date 】
For BST-SARS-25:Транспорт и складирање на -20±5℃ долго време.
For BST-SARS-DR-25:Транспорт на собна температура. Да се чува на -20±5℃ долго време.
Избегнувајте повторени циклуси на замрзнување-одмрзнување. Периодот на важност е привремено поставен на 12 месеци.
Погледнете ја етикетата за датумот на производство и употреба.
По првото отворање, реагенсот може да се чува на -20±5 ° C не повеќе од 1 месец или до крајот на периодот на реагенсот, кој датум е прв, за да се избегнат повторените циклуси на замрзнување-одмрзнување и бројот на замрзнување на реагенсот -циклусите на одмрзнување не треба да надминуваат 6 пати.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1. Применлив тип на примерок: Екстрактиран раствор на нуклеинска киселина.
2. Складирање и транспорт на примероци: Чувајте ги на -20±5℃ 6 месеци. Замрзнете ги и одмрзнете ги примероците не повеќе од 6 пати.
【Testing metход】
1.Nucleic acid extraction
Изберете соодветен комплет за екстракција на нуклеинска киселина за екстракција на вирусна нуклеинска киселина и следете ги соодветните упатства за комплетот. Се препорачува да се користи комплет за екстракција и прочистување на нуклеинска киселина произведен од Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. или еквивалентен комплет за прочистување на нуклеинска киселина.
2. Reaction reagent prepараtion
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Отстранете ја смесата SARS-Cov-2 и ензимската мешавина, целосно стопете ја на собна температура темелно измешајте со уредот Vortex и потоа кратко центрифугирајте.
(2) 16,5 мл ензимска смеса беше додадена во 358,5 мл САРС-Ков-2 Мешавина и темелно се измеша за да се добие мешаниот раствор за реакција.
(3) Подгответе чиста октална цевка од 0,2 mL PCR и означете ја со 15 uL од горенаведениот мешан раствор за реакција по бунар.
(4) Додадете 15 μL прочистен раствор на нуклеинска киселина, позитивната контрола и негативната контрола и внимателно покријте го капачето на окталната цевка.
(5) Добро измешајте со превртување наопаку и брзо центрифугирајте за да се концентрира течноста на дното на цевката.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) Додадете 375 ул. 2x пуфер во мешавината SARS-Cov-2 ((лиофилирана) за да се подготви реакциската мешавина. Темелно измешајте со пипетирање и потоа кратко центрифугирајте. (Откако ќе се подготви мешавината за реакција, се препорачува да се чува на -20℃ на долгорочно складирање.)
(2) Подгответе чиста октална цевка од 0,2 mL PCR и означете ја со 15 μL реакциона мешавина по бунар.
(3) Додадете 15 μL прочистен раствор на нуклеинска киселина, позитивната контрола и негативната контрола и внимателно покријте го капачето на окталната цевка.
(4) Добро измешајте со превртување наопаку и брзо центрифугирајте за да се концентрира течноста на дното на цевката.
3. PCR ampлифиcation (Ве молиме погледнете го прирачникот за инструмент за поставки за работа.）
3. 1 Ставете ја PCR 8-цевката во комората за примероци на флуоресцентниот PCR инструмент и поставете го примерокот што треба да се тестира, позитивната контрола и негативната контрола според редоследот на полнење.
3.2 Канал за детекција на флуоресценција:
(1) ORF1ab генот го избира каналот за откривање на FAM (Известувач: FAM, Quencher: Нема).
(2) N генот го избира каналот за откривање на VIC (Известувач: VIC, Quencher: Нема).
(3) Внатрешен стандарден ген го избира каналот за откривање на CY5 (Известувач: CY5, Quencher: Нема).
(4) Пасивната референца е поставена на ROX.
3.3 Поставување параметри на програмата PCR:
| Чекор | Температура (℃) | Време | Број на циклуси | |
| 1 | Реакција на обратна транскрипција | 50 | 15 мин | 1 |
| 2 | Taq ензимска активација | 95 | 2,5 мин | 1 |
| 3 | Taq ензимска активација | 93 | 10 с | 43 |
| Продолжување на жарење и стекнување на флуоресценција | 55 | 30 с | ||
По поставувањето, зачувајте ја датотеката и стартувајте ја програмата за реакција..
4.Results analysis
По завршувањето на програмата, резултатите автоматски се зачувуваат, а кривата на засилување се анализира. Кривата на засилување е поставена на стандардниот праг на инструментот.
【Explanation of test resuл.с 】
1. Определете ја валидноста на експериментот: Позитивната контрола FAM, VIC каналот треба да има типична крива на засилување, а вредноста на Ct е генерално помала од 34, но може да флуктуира поради различните поставки на прагот на различни инструменти. Негативната контрола FAM, VIC каналот треба да биде незасилена Ct. Договорено е горенаведените барања да се исполнуваат во исто време, во спротивно овој тест е неважечки.
2. Пресуда на резултатот
| FAM/VIC канал | Резултат на пресудата |
| Ct＜37 | Тестот за примерок е позитивен |
| 37≤Ct＜40 | Кривата на засилување е во форма на S, а сомнителните примероци треба да се преиспитаат; ако резултатите од преиспитувањето се конзистентни, тоа се оценува како позитивно, во спротивно е негативно |
| Ct≥40 Или без засилување | Тестот на примерокот е негативен (или под долната граница на откривање на комплетот) |
Забелешка: ( 1) Ако и FAM каналот и каналот VIC се позитивни во исто време, SARS-Cov-2 се одредува како позитивен.
(2) Ако FAM каналот или VIC каналот е позитивен, а другиот е негативен, тестот треба да се повтори. Ако во исто време е позитивен, ќе се оцени како позитивен на САРС-Ков-2, во спротивно ќе се оценува како негативен на САРС-Ков-2.
Сродни производи
-
Комплет за откривање на антитела за IgM/IgG COVID-19
Комплет за откривање на антитела COVID-19 (Метод на имунохроматографија со колоидно злато) 【ИМЕ НА ПРОИЗВОД】COVID- 19 IgM/IgG Комплет за детекција на антитела （Колоиден златен тест 【Имунохроматографија s/Kit 【 АПСТРАКТ】 Новите коронавируси припаѓаат на родот β. СОВИД-19 е акутна респираторна инфективна болест. Луѓето се генерално подложни. Во моментов, пациентите заразени со новиот коронавирус се главниот извор...
-
Комплет за екстракција или прочистување на нуклеинска киселина
Комплет за екстракција или прочистување на нуклеинска киселина или складиран на -20℃. Примерокот треба да се транспортира со виткање 0℃. Вовед Комплетот за екстракција или прочистување на нуклеинска киселина (Метод со магнетни зрна) е дизајниран за автоматско прочистување на РНК и ДНК од телесни течности (како што се брисеви, плазма, серум) со помош на автоматски инструменти за екстракција на нуклеинска киселина. Технологијата со магнетни честички обезбедува висококвалитетна ДНК/РНК која е погодна за ...
-
Комплет за антигенска анализа на САРС-КоВ-2 (Имунохроматогр...
Комплет за анализа на антиген на SARS-CoV-2 (Метод на имунохроматографија) Прирачник за производ 【ИМЕ НА ПРОИЗВОДОТ】 Комплет за анализа на антиген SARS-CoV-2 （Метод на имунохроматографија) 【СПЕЦИФИКАЦИИ ЗА ПАКУВАЊЕ】 1 Тест за коронавирус ‑АБТРАК. СОВИД-19 е акутна респираторна инфективна болест. Луѓето се генерално подложни. Во моментов, пациентите заразени од новиот коронавирус се главните...
-
Комплет за анализа на антиген на SARS-CoV-2
Комплет за анализа на антигенот SARS-CoV-2 (Метод на имунохроматографија) 【ИМЕ НА ПРОИЗВОДОТ】 Комплет за анализа на антиген SARS-CoV-2 (Метод на имунохроматографија) 【СПЕЦИФИКАЦИИ ЗА ПАКУВАЊЕ】 1 Тест/5Кит/Кит ТРАКТ】 На Новите коронавируси припаѓаат на родот β. СОВИД-19 е акутна респираторна инфективна болест. Луѓето се генерално подложни. Во моментов, пациентите заразени со новиот коронавирус се главниот извор на инфекција; асимптоматски заразени лица...